Production de protéines

Equipe

Resp. Scientifique. Luc Bousset

Production de protéines

Ce plateau maîtrise tous les outils nécessaires à la création de protéines mal repliées (Aβ, Tau, α-synucléine) par recombinaison génétique, à l’extraction et à la purification de ces protéines à partir d’échantillons cérébraux, ou encore à la production de vésicules enrichies en protéines spécifiques.

L’objet d’étude (protéines mal repliées recombinantes ou extraites du cerveau, protéines enrichies dans des vésicules) peut être caractérisé par différentes méthodes, de la cryo-microscopie électronique aux études in cellulo, en passant par les cultures organotypiques.

L’impact peut être évalué in vivo, chez le poisson zèbre, les rongeurs ou les primates. Cela permet d’étudier l’effet de différents agents chez l’animal, par exemple sur la pathologie synaptique ou la neuroinflammation, ou d’évaluer des thérapies.

Real-Time Quaking Induced Conversion (RT-QuIC)

Ce test est « un test précoce, rapide et spécifique pour les maladies liées au repliement anormal des protéines ». Il permet d’analyser différents types d’échantillons, tels que le cerveau ou le liquide céphalorachidien.

Le test RT-QuIC utilise un excès de prions normalement repliés produits par recombinaison génétique. Des échantillons susceptibles de contenir des protéines mal repliées sont ajoutés, ce qui entraîne le mauvais repliement et l’agrégation des protéines normalement repliées. Ces agrégats protéiques peuvent être détectés par fluorescence grâce à la thioflavine T, dans le spectre visible.

Activities

RT-QuIC pour l’Alpha-synucléine

Equipements 

Ultra-centrifugeuse
Lecteurs de plaque pour la RT-QuIC
Poste de sécurité microbiologique

Accès

Les activités de ce plateau sont accessibles à des utilisateurs externes sur demande, en général dans le cadre de collaborations scientifiques.