Microsc. super-résolutives

Notre laboratoire dispose d’équipements et d’expertises uniques pour l’étude par imageries avancées des maladies du système nerveux.

Equipe

Resp. Opérationel. Clémence Mille (Clemence.Mille@inserm.fr)

Resp. Scientifique. Christian Specht (Christian.Specht@inserm.fr)

Microscopie(s) super-résolutive(s)

Ce plateau met à disposition des équipements de microscopie super-résolutive (SMLM, SIM) qui permettent d’étudier les structures neuronales avec une résolution spatiale qui dépasse les limites de diffraction. Parmi ces technologies, la microscopie de localisation à molécule unique (SMLM) atteint une précision de l’ordre de 10 nanomètres, ce qui permet une caractérisation ultra-structurale des neurones ainsi que la quantification par comptage moléculaire et le suivi spatio-temporel de cibles spécifiques dans des cellules vivantes.

Activités

Ce plateau vise à étudier des processus pathologiques dans les neurones en utilisant des approches d’imagerie super-résolutives (SIM, SMLM).

La microscopie SIM (structured illumination microscopy) repose sur une illumination variée du champs de vision qui donne accès à des informations dans l’espace des fréquences par transformation de Fourier, améliorant ainsi la résolution à environ 100 nm. Cela permet la caractériserisation de détails structurels fins, comme l’illustre l’identification des anneaux de spectrine dans le segment initial de l’axone.

 SMLM (single molecule localisation microscopy) repose sur le principe de la détection de molécules uniques, qui peuvent être localisés avec une précision spatiale de l’ordre de la dizaine de nanomètres. Parmi les différentes approches, dSTORM généralement consiste dans un immunomarquage de cibles endogènes en utilisant des colorants organiques. Dans la configuration PALM on se sert de protéines fluorescentes photo-convertibles pour marquer et visualiser des cibles dans des cellules vivantes.

Financements

Equipements 

Notre laboratoire est équipé d’un poste de microscopie Elyra PS1 de ZEISS qui permet deux types d’imagerie super-résolutive, SIM et SMLM, en inclut PALM et dSTORM. D’ailleurs, un nanoscope SAFe d’Abbelight offre des options supplémentaires de la SMLM, notamment le démixage spectrale et l’imagerie astigmatique pour une localisation trois-dimensionnelle des détections de molécules uniques.

Accès

Ces équipements sont disponibles à des utilisateurs externes sur demande, généralement dans un cadre de collaboration scientifique. Les projets soumis sont évalués par une commission scientifique composé d’experts en différentes technologies d’imagerie. Contact: christian.specht@inserm.fr