Imagerie optique et confocale

MICROSCOPIE PHOTONIQUE

Discutons de votre projet

 

Observer le vivant avec précision, de la celluleau tissu, grâce à des systèmes d’imagerie complémentaires et un accompagnement expérimental sur mesure. Nous vous aidons à choisir le mode d’acquisition, les fluorophores, l’objectif et les paramètres adaptés à votre échantillon et à la mesure attendue.

Pôle technologique Imagerie avancée
Acquisition · Optimisation · Analyse

 

Resp. Opérationnelle :
Dalia El Arawi
(dalia.el-arawi@inserm.fr)

Resp. Scientifique :
Marcel Tawk
(marcel.tawk@inserm.fr)

Spectral
01

Multiplexage & démixage

Séparer finement les fluorophores, même lorsque leurs spectres se chevauchent.

Dynamique moléculaire
02

Time-lapse & FRAP

Suivre des processus biologiques et mesurer la mobilité moléculaire au cours du temps.

Volumique
03

Z-stack & reconstruction 3D

Acquérir des volumes multi-couches du niveau subcellulaire au tissu.

Grand champ
04

Mosaïque & multi-position

Explorer de larges échantillons avec un assemblage automatisé et reproductible.

Intéractions moléculaires
05

FRET & analyses de proximité

étudier la proximité et les interactions entre protéines à l’échelle nanométrique.

Quantitatif
06

Analyse multi-échelle

Concevoir une acquisition adaptée à la mesure et à l’analyse d’images.

Confocal inversé Leica SP8

Le système Leica SP8 est un outil incontournable de la recherche en biologie moderne. Grâce à sa technologie de balayage laser, il permet de réaliser des coupes optiques fines, en éliminant les signaux hors focus. C’est l’outil de référence pour l’imagerie 3D et le suivi de molécules spécifiques sur échantillons fixes ou vivants.

Ce microscope offre une flexibilité totale pour l’imagerie du vivant grâce à son enceinte thermostatique, ses détecteurs hybrides haute sensibilité et sa capacité à reconstruire de grands volumes en 3D via une platine motorisée.

Microscope Leica SP8 Neuro-Bicêtre
CONFIGURATION SP8
Éclairage en champ large

Mode épifluorescence

01

Source : Leica EL 6000 (durée supérieure à 2 000 h) et intensité réglable sur cinq niveaux.

Cubes filtres

A (UV) : Exc. 340–380 / Dichr. 400 / Ém. LP 425 — DAPI, Hoechst
I3 (Bleu) : Exc. 450–490 / Dichr. 510 / Ém. LP 515 — GFP, FITC, Alexa 488
N2.1 (Vert) : Exc. 515–560 / Dichr. 580 / Ém. LP 590 — TRITC, Cy3, Alexa 546/555/568
Excitation confocale

Sources laser & détection

02
405 458 476 488 496 514 561 633 nm
Détection spectrale

2 détecteurs hybrides HyD, 2 photomultiplicateurs PMT, sélection spectrale entre 400 et 800 nm et canal de transmission dédié.

Numérisation

Dynamique d’image en 8, 12 ou 16 bits.

Optique

Objectifs disponibles

03

Modèle : Leica DMI6000 inversé et motorisé.

Grossissement Ouverture numérique Immersion Distance de travail
10× 0.30 Air 11 000 µm
20× 0.75 Eau, huile ou glycérol 660 µm
40× 1.10 Eau 650 µm
63× 1.20 Eau 300 µm
63× 1.40 Huile 140 µm
Automatisation

Platine & environnement

04
  • Platine motorisée XY haute précision
  • Mosaïques et acquisitions multi-positions
  • Lames, boîtes de Pétri et plaques multi-puits
  • Enceinte thermostatée et circulation de CO₂
Acquisition

Modes d’acquisition

05

Dimensionnel

xyz xzy

Temporel

xt xyt xzt xzyt

Spectral

xyλ xzλ xyλz

Combiné

xyλt xzλt xyzλt

Applications avancées

Time-lapse FRAP / FRAP XT FRET SE / AB

Les acquisitions dimensionnelles, temporelles et spectrales peuvent être réalisées seules ou combinées selon le projet.

EXEMPLES D’APPLICATION SP8

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Épifluorescence droit Leica DM6B

Ce système d’épifluorescence entièrement motorisé offre une solution complète pour l’imagerie cellulaire et tissulaire en champ large. Sa motorisation et son intégration au logiciel LAS X permettent d’automatiser les acquisitions, de réaliser des mosaïques et d’explorer rapidement de grandes zones d’intérêt. Adapté aux applications en fluorescence et en lumière transmise, il facilite la mise en place de protocoles d’imagerie reproductibles et personnalisés, tout en réduisant les manipulations manuelles.

Microscope Leica SP8 Neuro-Bicêtre
CONFIGURATION DM6B
Éclairage en champ large

Mode épifluorescence

01

Source : Leica EL6000 (durée de vie supérieure à 2 000 h), intensité réglable sur 5 niveaux.

Cubes filtres

DAPI : Exc. 325–375 / Dichr 400 / Ém. 435–485 — DAPI, Hoechst
L5 : Exc. 460–500 / Dichr 505 / Ém. 512–542 — GFP, FITC, Alexa 488
Red : Exc. 541–551 / Dichr 556 / Ém. 560–584 — TRITC, Cy3, Alexa 546/555/568
Y5 : Exc. 590–650 / Dichr 660 / Ém. 662–738 — Cy5, Alexa 647
Imagerie numérique

Caméras & détection

02
ORCA-Flash4.0 LT (sCMOS, Hamamatsu)

Caméra monochrome haute résolution (2048 × 2048 pixels, 1X, 6.45 µm), adaptée à l’acquisition en fluorescence.

DMC2900 (CMOS couleur, Leica)

Caméra dédiée au fond clair (2048 × 1536 pixels, 0.55X, 3.2 µm), idéale pour l’observation d’échantillons histologiques (ex. H&E).

Numérisation

Dynamique d’image en 8 ou 16 bits (Fluo) et 8 ou 10 bits (visible).

Optique

Objectifs disponibles

03

Modèle : Leica DM6 B droit motorisé.

Grossissement Ouverture numérique Immersion Distance de travail
2.5× 0.07 Air 9 200 µm
10× 0.30 Air 11 000 µm
20× 0.40 Air 7 500 µm
40× 0.80 Air 400 µm
100× 1.32 Huile 180 µm
Automatisation

Platine & environnement

04
  • Platine motorisée XYZ haute précision
  • Acquisitions multi-positions, en Z et mosaïques (stitching)
  • Supports compatibles : lames et boîtes de Pétri
Pilote

Logiciel d’acquisition

05

Interface principale

Leica LAS X Navigator

Capacités d'acquisition

Multi-positions Piles Z Mosaïques (Stitching)

Le système complet est entièrement piloté par le logiciel Leica LAS X Navigator pour automatiser l'acquisition et l'assemblage des images.

EXEMPLES D’APPLICATION DM6B

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Numériseur de lames Leica Aperio VERSA 200

Le Leica Aperio VERSA est un scanner de lames polyvalent dédié à la numérisation haute résolution d’échantillons tissulaires. Il permet des acquisitions en champ clair, fluorescence et FISH, offrant une solution adaptée à de nombreuses applications en recherche et en analyse de biomarqueurs. Grâce à sa numérisation automatisée, il facilite l’acquisition de lames entières et l’exploration de grandes zones tissulaires pour des analyses quantitatives et multiparamétriques..

Microscope Leica SP8 Neuro-Bicêtre
CONFIGURATION VERSA
Éclairage en champ large

Mode épifluorescence

01

Source : PC X-Cite 120Q (durée de vie supérieure à 2 000 h), intensité réglable sur 5 niveaux.

Cubes filtres

DAPI : Exc. 325–375 / Dichr 400 / Ém. 435–485 — DAPI, Hoechst
GRN#2 : Exc. 472–498 / Dichr 505 / Ém. 510–540 — GFP, FITC, Alexa 488
Gold : Exc. 541–551 / Dichr 556 / Ém. 561–584 — TRITC, Cy3, Alexa 546/555
CY5 : Exc. 625–655 / Dichr 660 / Ém. 665–715 — Cy5, Alexa 647
Imagerie numérique

Caméras & détection

02
Zyla 5.5 (CMOS, Andor)

Caméra monochrome haute résolution (2560 × 2160 pixels, 6.5 µm), adaptée à l’acquisition en fluorescence.

Grasshopper 3 (CMOS couleur, Point Grey)

Caméra dédiée au fond clair (2048 × 2048 pixels, 5.5 µm), idéale pour l’observation d’échantillons histologiques (ex. H&E).

Numérisation

Dynamique d’image en 12 bits (Fluo) et 8 bits (visible).

Optique

Objectifs disponibles

03

Modèle : Leica DM6000B droit motorisé.

Grossissement Ouverture numérique Immersion
1.25× 0.04 Air
5× 0.15 Air
10× 0.32 Air
20× 0.55 Air
40× 0.85 Air
40× 1.30 Huile
Automatisation

Platine & environnement

04
  • Chargeur automatique de 200 lames avec lecteur d’étiquettes et de codes-barres
  • Platine motorisée XYZ haute précision
  • Acquisitions automatisées multi-positions et en mosaïque
  • Piles Z :
    Fond clair: 10 plans maximum - pas Z réglable de 0.1 à 20 µm
    Fluorescence: 25 plans maximum - pas Z de 0.1 à 3 µm
  • Distributeur automatique d’huile pour les objectifs à immersion
  • Stockage réseau : serveur QNAP TS-831X d’une capacité de 22 To
  • Support compatible : lames en verre à bords carrés (75-76 x 25 mm, épaisseur 1.2 mm) et lamelles de 170 µm
Pilote

Logiciel d’acquisition

05

Interface principale

Leica Apério VERSA

Capacités d'acquisition

Multi-positions Piles Z Mosaïques (Stitching)

Le système complet est entièrement piloté par le logiciel Leica LAS X Navigator pour automatiser l'acquisition et l'assemblage des images.

EXEMPLES D’APPLICATION VERSA

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Épifluorescence inversé Invitrogen EVOS M3000

Le EVOS M3000 est un système d’imagerie numérique inversé compact, conçu pour l’observation rapide et routinière des cultures cellulaires et tissulaires. Il permet des acquisitions en lumière transmise, contraste de phase et fluorescence sur deux canaux: vert et rouge. Simple d’utilisation, il intègre une caméra CMOS couleur et un outil d’analyse automatique de la confluence cellulaire, facilitant le suivi de la croissance et de la qualité des cultures en temps réel.

Microscope Leica SP8 Neuro-Bicêtre
CONFIGURATION EVOS M3000
Éclairage LED

Modes d’imagerie

01

Observation : fond clair, contraste de phase, couleur et fluorescence à deux canaux.

Cubes de fluorescence installés

GFP : Exc. 459-481 nm / Ém. 489-531 nm — GFP, ATTO 465, Alexa Fluor 488
RFP : Exc. 511-551 nm / Ém. 573-613 nm — RFP, Cy3, DiI, Alexa Fluor 555
Imagerie numérique

Caméra & visualisation

02
Caméra CMOS couleur

Résolution de 3,2 mégapixels (2064 × 1536 pixels), adaptée à l’imagerie en fond clair, en couleur et en fluorescence.

Acquisition

Images monochromes ou couleur en 8 bits et enregistrement vidéo au format MP4.

Affichage intégré

Écran tactile LCD de 10,1 pouces pour l’observation, le réglage et l’acquisition sans ordinateur externe.

Optique

Objectifs disponibles

03

Objectifs fluorite à longue distance de travail à air, adaptés à la fluorescence, au fond clair et au contraste de phase.

Grossissement Ouverture Numérique
4× 0.13
10× 0.30
20× 0.45
Culture cellulaire

Platine & applications

04
  • Microscope numérique inversé avec platine manuelle
  • Observation de cellules vivantes ou fixées
  • Compatible avec lames, boîtes de Petri, flasques et plaques multipuits
  • Analyse automatique de la confluence en temps réel
  • Mesure de la confluence actualisée lors du déplacement de l’échantillon
Système intégré

Acquisition, analyse & export

05

Interface

Écran tactile Système autonome

Analyse

Confluence en temps réel

Formats

TIFF PNG JPG MP4

Transfert

USB

Le système EVOS M3000 permet de contrôler rapidement l’état, la morphologie et la confluence des cultures cellulaires, puis d’exporter directement les images et les vidéos.

EXEMPLES D’APPLICATION EVOS M3000

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INFRASTRUCTURE MOBILISÉE

La plateforme d’imagerie de l’UMS44 sur place

 

Bénéficiez du matériel de l’UMS 44 sur le site de Bicêtre pour accéder à des équipements de haute technologie et renforcer votre expertise scientifique!

Arrayscan VTI de Thermo Fisher

L’ArrayScan VTI est une station automatisée d’imagerie et d’analyse cellulaire multiparamétrique à haut débit dédiée à la numérisation rapide de cellules fluorescentes sur plaques ou lames. Grâce au logiciel associé vHCS Studio v6.6.0, il permet de repérer, analyser et quantifier de multiples processus intracellulaires, tels que l’expression protéique, l’activation des voies de signalisation, la morphométrie ou encore la neurogenèse, offrant ainsi une solution rapide et reproductible pour la recherche biomédicale.

Microscope Leica SP8 Neuro-Bicêtre

Confocal inversé spinning disk

Le microscope à disque tournant « spinning-disk » est un outil de pointe dédié à l’observation haute résolution d’échantillons vivants (cellules, organoïdes, petits animaux). Grâce à une illumination laser simultanée de la zone d’observation, il offre un compromis idéal entre performance et préservation biologique, permettant de réduire significativement la durée d’acquisition, le photoblanchiment et la phototoxicité des échantillons fluorescents.

Microscope Leica SP8 Neuro-Bicêtre

Confocal inversé Zeiss Confocor 2

Le système ConfoCor 2 est un microscope confocal à balayage laser conçu pour la spectroscopie de corrélation de fluorescence (FCS) et les techniques associées. Il offre une détection et une analyse très sensibles de la dynamique et des interactions moléculaires dans un volume d’observation restreint et défini.

Microscope Leica SP8 Neuro-Bicêtre
CONFIGURATION Confocor 2
EXEMPLES D’APPLICATION Confocor 2

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PRÉPARER UNE EXPÉRIENCE

Parlons de votre question biologique avant de réserver!

 

Un échange en amont permet d’optimiser le marquage, la résolution, le temps d’acquisition et la stratégie d’analyse.

Nous Trouver

📍

 

Neuro-Bicêtre

INSERM U1195 | CNRS EMR 2000

Hôpital Bicêtre,
Bâtiment Grégory Pincus,
80 rue du Général Leclerc
94270 Le Kremlin-Bicêtre

👤

Directeur : Marc Dhenain

👩‍💼

 

Gestionnaire : Léa Etcheverry
📞 +33 1 49 59 19 58
✉️ lea.etcheverry@inserm.fr

Informations d’accès

🚗 En voiture

Accès autorisé uniquement sur convocation.

🚇 En métro

Ligne 7 : Le Kremlin-Bicêtre

Ligne 14 : Hôpital Bicêtre

🚌 En bus

Le Kremlin-Bicêtre-Métro : 47 125 131

Hôpital Bicêtre – Benserade : 125 186 323